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L'HPLC si distingue dalla cromatografia liquida tradizionale ("bassa pressione") perché le pressioni operative sono significativamente più elevate (50-350 bar), mentre la normale cromatografia liquida si basa tipicamente sulla forza di gravità per far passare la fase mobile attraverso la colonna.
- Qual è la differenza tra cromatografia su colonna e HPLC?
- Perché l'HPLC è chiamata cromatografia liquida ad alta pressione?
- A cosa serve la cromatografia liquida?
- Quanti tipi di HPLC esistono?
- Quali sono i rilevatori utilizzati in HPLC?
- Perché il pH è importante nell'HPLC?
- L'HPLC è quantitativa o qualitativa?
- Qual è il principio di base dell'HPLC?
- Quali sono i 4 tipi di cromatografia?
- Quale liquido viene utilizzato per la cromatografia?
- Come gestisci gli strumenti HPLC?
Qual è la differenza tra cromatografia su colonna e HPLC?
La cromatografia liquida ad alte prestazioni è fondamentalmente una forma altamente migliorata di cromatografia su colonna. Invece di lasciare che un solvente goccioli attraverso una colonna per gravità, viene forzato attraverso alte pressioni fino a 400 atmosfere. Questo lo rende molto più veloce.
Perché l'HPLC è chiamata cromatografia liquida ad alta pressione?
Dimensioni delle particelle più piccole [<10 micron] sono necessari per migliorare il potere di separazione. Tuttavia, le particelle più piccole hanno una maggiore resistenza al flusso, quindi sono necessarie pressioni più elevate per creare la portata del solvente desiderata. ... Questa era chiamata cromatografia liquida ad alta pressione o HPLC.
A cosa serve la cromatografia liquida?
La cromatografia viene utilizzata per separare proteine, acidi nucleici o piccole molecole in miscele complesse. La cromatografia liquida (LC) separa le molecole in una fase mobile liquida utilizzando una fase stazionaria solida. La cromatografia liquida può essere utilizzata per applicazioni analitiche o preparative.
Quanti tipi di HPLC esistono?
Le analisi HPLC rientrano in quattro diverse categorie: (1) cromatografia in fase inversa in cui la fase stazionaria è idrofobica (C18-silice modificata), (2) cromatografia in fase normale in cui la fase stazionaria è idrofila (silice), (3) cromatografia di interazione idrofila, un ibrido delle tecniche 1 e 2 e (4) ione ...
Quali sono i rilevatori utilizzati in HPLC?
Rivelatori HPLC
- Rivelatori UV-Vis. L'SPD-20A e l'SPD-20AV sono rilevatori UV-Vis per uso generico che offrono un livello eccezionale di sensibilità e stabilità. ...
- Rilevatore di indice di rifrazione. ...
- Rivelatori a fluorescenza. ...
- Rilevatore di dispersione della luce evaporativa. ...
- Rivelatore di conducibilità.
Perché il pH è importante nell'HPLC?
Quando i campioni contengono composti ionizzabili, il pH della fase mobile può essere una delle variabili più importanti nel controllo della ritenzione in una separazione HPLC in fase inversa (RP-HPLC). ... Poiché la maggior parte dei composti analizzati mediante RP-HPLC contiene uno o più gruppi funzionali acidi o basici, la maggior parte delle fasi mobili richiede il controllo del pH.
L'HPLC è quantitativa o qualitativa?
Per la maggior parte delle analisi HPLC, le aree dei picchi vengono utilizzate per i calcoli quantitativi, sebbene, nella maggior parte dei casi, si possano ottenere risultati equivalenti con l'altezza del picco.
Qual è il principio di base dell'HPLC?
Il principio di separazione dell'HPLC si basa sulla distribuzione dell'analita (campione) tra una fase mobile (eluente) e una fase stazionaria (materiale di riempimento della colonna). A seconda della struttura chimica dell'analita, le molecole vengono ritardate durante il passaggio alla fase stazionaria.
Quali sono i 4 tipi di cromatografia?
Esistono quattro tipi principali di cromatografia. Si tratta di cromatografia liquida, gascromatografia, cromatografia su strato sottile e cromatografia su carta. La cromatografia liquida viene utilizzata nel mondo per testare campioni di acqua per cercare l'inquinamento in laghi e fiumi.
Quale liquido viene utilizzato per la cromatografia?
Le fasi liquide non polari comuni includono silicone e vari idrocarburi. Un'alternativa a questo tipo di colonna viene utilizzata nell'HPLC, in cui una fase liquida legata viene utilizzata come fase stazionaria. Il liquido meno polare è legato chimicamente al gel di silice polare nella colonna.
Come gestisci gli strumenti HPLC?
Pulire la siringa con il campione prima di iniettare il campione in HPLC. Quindi iniettare e caricare il campione in HPLC, i componenti del campione verranno rilevati dal rivelatore e il tempo verrà contato. 12. Il picco di ogni componente verrà mostrato sul monitor al diverso tempo di ritenzione.
