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Qual è la differenza tra citometria a flusso e FACS

Qual è la differenza tra citometria a flusso e FACS

FACS viene utilizzato come selezionatore di cellule e arricchito per un sottoinsieme di cellule che viene spesso studiato ulteriormente in dettaglio utilizzando la citometria a flusso o altre tecniche analitiche2. La citometria a flusso viene utilizzata per l'analisi cellulare e si concentra sulla misurazione dell'espressione o della co-espressione di proteine ​​all'interno di una popolazione mista di cellule.

  1. Qual è lo scopo di FACS?
  2. Cos'è la tecnica FACS?
  3. Cosa sono FSC e SSC nella citometria a flusso?
  4. Cosa può rilevare la citometria a flusso?
  5. La citometria a flusso può rilevare le cellule morte?
  6. La citometria a flusso può rilevare la leucemia?
  7. Cosa significa buffer FACS?
  8. Come rappresenti i dati FACS?
  9. Cosa significa gating nella citometria a flusso?
  10. Qual è il principio della citometria a flusso?
  11. Come si rappresentano i dati della citometria a flusso?

Qual è lo scopo di FACS?

L'ordinamento cellulare attivato da fluorescenza (FACS) è un tipo specializzato di citometria a flusso. Fornisce un metodo per ordinare una miscela eterogenea di cellule biologiche in due o più contenitori, una cellula alla volta, in base alle caratteristiche di diffusione della luce e fluorescenza specifiche di ciascuna cellula.

Cos'è la tecnica FACS?

L'ordinamento cellulare attivato da fluorescenza (FACS), a volte chiamato ordinamento cellulare assistito da fluorescenza, è un tipo specializzato di citometria a flusso che utilizza marcatori fluorescenti per mirare e isolare i gruppi cellulari. Questa tecnica di smistamento delle cellule è comunemente utilizzata nella ricerca sull'emopoiesi, sull'oncologia e sulla biologia delle cellule staminali.

Cosa sono FSC e SSC nella citometria a flusso?

Il gating forward versus side scatter (FSC vs SSC) è comunemente usato per identificare le celle di interesse in base alle dimensioni e alla granularità (complessità). Si suggerisce spesso che la dispersione in avanti indichi la dimensione della cellula mentre la dispersione laterale si riferisce alla complessità o granularità della cellula.

Cosa può rilevare la citometria a flusso?

La citometria a flusso è un metodo di laboratorio utilizzato per rilevare, identificare e contare cellule specifiche. Questo metodo può anche identificare particolari componenti all'interno delle cellule. Queste informazioni si basano su caratteristiche fisiche e / o marcatori chiamati antigeni sulla superficie cellulare o all'interno di cellule che sono univoci per quel tipo di cellula.

La citometria a flusso può rilevare le cellule morte?

La perdita dell'integrità della membrana è un indicatore definitivo della morte cellulare nei test citometrici a flusso. Le cellule che escludono un colorante cellulare morto sono considerate vitali, mentre le cellule con una membrana compromessa consentono al colorante all'interno della cellula di colorare un componente interno, identificando così la cellula come morta.

La citometria a flusso può rilevare la leucemia?

L'immunofenotipizzazione mediante citometria a flusso può essere eseguita su sangue, midollo osseo o altri campioni per fornire queste informazioni aggiuntive. È in grado di rilevare cellule normali e cellule anormali il cui modello di marcatori è tipicamente visto con tipi specifici di leucemia e linfoma.

Cosa significa buffer FACS?

Buffer di colorazione per citometria a flusso (tampone FACS)

Questo tampone FACS di base è una soluzione salina tamponata che può essere utilizzata per l'immunofluorescenza. protocolli di colorazione, fasi di diluizione di anticorpi e cellule, fasi di lavaggio necessarie per la colorazione della superficie e l'analisi citometrica a flusso.

Come rappresenti i dati FACS?

I dati FACS sono comunemente presentati come istogrammi unidimensionali o visualizzazioni bidimensionali (display a punti o mappe di contorno) con assi logaritmici che si estendono su un intervallo da 'quattro a cinque decadi', che rappresentano celle con valori di fluorescenza che differiscono da 10.000 a 100.000 -piega tra le estremità inferiore e superiore della scala.

Cosa significa gating nella citometria a flusso?

Il gating nella citometria a flusso è semplicemente l'identificazione sequenziale e il raffinamento di una popolazione cellulare di interesse utilizzando un pannello di marcatori.

Qual è il principio della citometria a flusso?

Il principio di base della citometria a flusso è il passaggio di cellule in un unico file davanti a un laser in modo che possano essere rilevate, contate e ordinate. I componenti delle cellule vengono etichettati in modo fluorescente e quindi eccitati dal laser per emettere luce a lunghezze d'onda variabili.

Come si rappresentano i dati della citometria a flusso?

I dati della citometria a flusso sono tipicamente rappresentati in due modi: istogrammi, che misurano o confrontano solo un singolo parametro, e diagrammi a punti che confrontano 2 o 3 parametri simultaneamente su un diagramma a dispersione bidimensionale o tridimensionale.

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